Western Blot 膜灰度定量（按次付费）

对 Western Blot 膜图做 ImageJ 矩形框选法的标准化灰度定量：8-bit 灰度化 → rolling ball 背景扣除（半径 50，light background）→ 极性自动判断 → 固定尺寸矩形测量 → 按泳道输出定量表。

算法在服务端运行，本 Skill 只负责编排「请求 → 支付 → 重试 → 展示」，不接触任何私钥。

触发词

• 「分析这张 WB 图」「WB 灰度定量」「跑一下 western blot 定量」
• 「这条带比那条带亮多少」「算一下膜上各泳道的 IntDen」
• 「批量定量 WB 膜」「估算蛋白相对表达量」

输入参数

单次价格

¥0.50 / 次（每次调用分析一张膜图）。

三处价格必须完全一致，否则用户无法付款：

1. 支付宝 AI 付站点「服务注册」时登记的单价
2. 服务端 402 账单里的 amount
3. SkillHub 发布表单「完善计费」里的单次调用价格

依赖安装

无需安装任何依赖，Node.js ≥ 18 即可（脚本只用内建模块）。

买家侧支付能力（在 Agent 对话内扫码付费用）：

npx -y @alipay/agent-payment@latest install

调用流程

三步走，每一步都有明确的成功标志：

# 1. 取账单（不需要付款）
node scripts/wb-quant-paid.mjs probe --image "D:/data/membrane.tif"

# 2. 支付（交给支付宝支付能力，用户在对话内授权）
node scripts/wb-quant-paid.mjs pay

# 3. 携凭证重试，服务端验付后返回定量结果
node scripts/wb-quant-paid.mjs complete --proof "<Payment-Proof>"

1. probe —— 取 402 账单

请求分析接口但不带支付凭证，服务端返回 HTTP 402 与 Payment-Needed 响应头。脚本解码账单、打印金额与服务名，并把账单存到 .state/<out_trade_no>.json。

这一步不产生任何费用。 若服务端返回 200（配置为免费模式），会直接输出结果表。

2. pay —— 支付

把已保存的账单交给 alipay-bot 完成收银与授权。用户在当前对话里确认金额即可付款，不需要跳转站外页面。

若环境里没有 alipay-bot，脚本会把账单原文写到 .state/<out_trade_no>.bill.json 并提示安装命令 —— 这属于环境缺依赖，不是支付失败。

3. complete —— 携凭证重试

把 Payment-Proof 放进请求头重试同一个请求（同一张图、同样参数）。服务端会：

1. 调 alipay.aipay.agent.payment.verify 验证凭证
2. 校验 active=true、amount 与订单一致、out_trade_no 与本地订单一致
3. 交付分析结果并调 alipay.aipay.agent.fulfillment.confirm 回报履约

成功返回 200 与结果表；凭证无效或已过期则仍返回 402，脚本退出码为 2 —— 这种情况不要重复付款，先核对订单号。

输出

泳道     Area        Mean       IntDen     相对最大
   1     4620      126.64       585083      87.2%
   6     4620      145.29       671250     100.0%
  13     4620        7.15        33015       4.9%

• Area 固定（同一张图内每条泳道框尺寸一致），所以 Mean / IntDen 可直接横向比较
• IntDen = Area × Mean，是相对定量的主指标
• 相对最大 以最强条带为 100% 归一化
• 淡条带数值必然更小：测量在反相图上进行，与肉眼判断方向一致

完整 JSON 结果另存到 .state/results/<out_trade_no>.json。

边界与约定

• 不做诊断结论：只给灰度定量值，不判断蛋白表达差异是否具有生物学意义，统计检验请自行完成
• 不替代重复实验：单张膜的结果不能作为独立重复（n=1），至少 3 次独立实验才具备统计意义
• 图像不出本机以外的第三方：图片只发给本服务端用于计算，不落盘、不外传
• 图片质量要求：过曝（条带饱和）会使定量失真，脚本不做反卷积补偿
• 服务端不可用（503 / 网络错误）时不给结论，明确报错让用户重试

计费异常处理

服务端信息

协议契约与字段说明见 references/server-contract.md。私钥、appId、serviceId 全部保存在服务端环境变量，不在本 Skill 包内。